Perbedaan Utama – Sentrifugasi Gradien Diferensial vs Kepadatan

Sentrifugasi adalah metode pemisahan di mana rotasi sampel di sekitar sumbu tetap menghasilkan gaya sentrifugal (g). Partikel atau sel dalam sampel dipaksa turun melalui media cair oleh gaya sentrifugal. Laju sedimentasi ditentukan oleh densitas dan ukuran partikel atau sel. Karena sedimentasi partikel atau sel dengan kepadatan dan ukuran yang berbeda terjadi pada tingkat yang berbeda, mereka secara fisik terpisah satu sama lain pada beberapa titik sentrifugasi. Sentrifugasi diferensial dan sentrifugasi gradien kepadatan adalah dua jenis sentrifugasi utama. NS perbedaan utama antara sentrifugasi diferensial dan gradien kepadatan adalah bahwa fraksinasi dilakukan berdasarkan ukuran dalam sentrifugasi diferensial sedangkan fraksinasi dilakukan berdasarkan densitas dalam sentrifugasi gradien densitas.

Area Utama yang Dicakup

1. Apa itu Sentrifugasi Diferensial? – Definisi, Fakta, Proses 2. Apa itu Sentrifugasi Gradien Kepadatan – Definisi, Fakta, Proses 3. Apa Persamaan Antara Sentrifugasi Gradien Diferensial dan Kepadatan? – Garis Besar Fitur Umum 4. Apa Perbedaan Antara Sentrifugasi Gradien Diferensial dan Kepadatan – Perbandingan Perbedaan Kunci

Istilah Kunci: Densitas, Sentrifugasi Gradien Kepadatan, Sentrifugasi Diferensial, Pelleting Diferensial, Sentrifugasi Kesetimbangan, Sentrifugasi Isopiknik, Sentrifugasi Zona Laju, Ukuran

Apa itu Sentrifugasi Diferensial?

Sentrifugasi diferensial mengacu pada bentuk sentrifugasi yang paling sederhana. Ia juga dikenal sebagai pelet diferensial. Komponen sel dapat dipisahkan dengan sentrifugasi diferensial. Sentrifugasi diferensial didasarkan pada ukuran partikel dalam larutan. Dengan demikian, partikel dengan ukuran yang berbeda mengendap pada tingkat yang berbeda selama sentrifugasi. Partikel yang lebih besar mengendap lebih cepat daripada partikel yang lebih kecil. Laju sedimentasi dapat ditingkatkan dengan meningkatkan gaya sentrifugal. Sentrifugasi diferensial ditunjukkan pada gambar 1.

Gambar 1: Sentrifugasi Diferensial

Idealnya, sentrifugasi diferensial digunakan untuk memanen sel atau untuk menghasilkan fraksi subseluler kasar dari homogenat jaringan. Misalnya, homogenat hati mungkin mengandung inti, mitokondria, lisosom, dan vesikel membran. Ketika homogenat hati disentrifugasi dengan kecepatan rendah untuk waktu yang singkat, inti besar mengendap di pelet. Ketika gaya sentrifugal yang lebih tinggi digunakan, mitokondria juga mengendap di pelet. Karena homogenitas sampel biologis, sedimentasi selalu mencemari.

Apa itu Sentrifugasi Gradien Kepadatan?

Sentrifugasi gradien kepadatan mengacu pada metode pemisahan di mana zat terkonsentrasi dalam larutan garam cesium atau sukrosa. Ini terlibat dalam fraksinasi partikel berdasarkan kerapatan daya apung. Garam cesium atau larutan sukrosa disebut gradien densitas. Dua jenis sentrifugasi gradien densitas adalah sentrifugasi zona-laju dan sentrifugasi isopiknik.

Sentrifugasi Tingkat-Zona

Selama sentrifugasi zona-laju, sampel berlapis sebagai zona sempit di atas gradien kepadatan. Partikel bergerak dengan kecepatan yang berbeda di bawah gaya sentrifugal berdasarkan densitasnya. Tingkat sedimentasi yang sebenarnya terutama tergantung pada ukuran dan massa partikel. Karena kerapatan partikel lebih tinggi dari gradien kerapatan, semua partikel menghasilkan pelet. Sentrifugasi gradien densitas ditunjukkan pada gambar 2.

Gambar 2: Sentrifugasi Gradien Kepadatan

Sentrifugasi isopiknik

Sentrifugasi isopik dimulai dengan larutan homogen. Di bawah gaya sentrifugal, partikel bergerak sampai kerapatannya mirip dengan gradien kerapatan. Dengan demikian, sentrifugasi isopiknik juga dikenal sebagai apung atau sentrifugasi keseimbangan. Partikel biologis bergantung pada tekanan osmotik dari gradien densitas. Oleh karena itu, media gradien harus mengandung tekanan osmotik yang sama dengan sel atau organel.

Persamaan Antara Sentrifugasi Gradien Diferensial dan Kepadatan

Perbedaan Antara Sentrifugasi Gradien Diferensial dan Kepadatan

Definisi

Sentrifugasi Diferensial: Sentrifugasi diferensial mengacu pada metode pemisahan di mana komponen sel dipisahkan berdasarkan kepadatannya dalam sentrifugal sesuai dengan gaya sentrifugal yang mereka alami.

Sentrifugasi Gradien Kepadatan: Sentrifugasi gradien kepadatan mengacu pada metode pemisahan di mana zat terkonsentrasi dalam larutan garam cesium atau sukrosa.

Pemisahan

Sentrifugasi Diferensial: Pemisahan terjadi berdasarkan ukuran partikel dalam sentrifugasi diferensial.

Sentrifugasi Gradien Kepadatan: Pemisahan terjadi berdasarkan densitas partikel dalam sentrifugasi gradien densitas.

Jenis Molekul

Sentrifugasi Diferensial: Sentrifugasi diferensial digunakan untuk memisahkan sel, organel atau makromolekul.

Sentrifugasi Gradien Kepadatan: Sentrifugasi gradien densitas digunakan untuk memisahkan molekul atau partikel.

Jenis Sampel

Sentrifugasi Diferensial: Sebuah organ homogen digunakan sebagai sampel dalam sentrifugasi diferensial.

Sentrifugasi Gradien Kepadatan: Larutan homogen digunakan sebagai sampel dalam sentrifugasi gradien densitas.

larutan gula

Sentrifugasi Diferensial: Tidak ada larutan gula yang digunakan dalam sentrifugasi diferensial.

Sentrifugasi Gradien Kepadatan: Sukrosa atau larutan gula apa pun digunakan dalam sentrifugasi gradien densitas.

Kemudahan Metodenya

Sentrifugasi Diferensial: Sentrifugasi diferensial mudah digunakan.

Sentrifugasi Gradien Kepadatan: Sentrifugasi gradien densitas sulit digunakan.

Kontaminasi

Sentrifugasi Diferensial: Tidak ada kontaminasi yang terjadi dalam sentrifugasi diferensial.

Sentrifugasi Gradien Kepadatan: Beberapa kontaminasi selalu mungkin terjadi dalam sentrifugasi gradien densitas.

Kesimpulan

Sentrifugasi diferensial dan densitas gradien adalah dua metode sentrifugasi yang digunakan untuk memisahkan partikel. Sentrifugasi diferensial memisahkan partikel berdasarkan ukurannya. Namun, sentrifugasi gradien densitas memisahkan partikel. Perbedaan utama antara sentrifugasi diferensial dan gradien kepadatan adalah jenis sifat fisik yang menjadi dasar setiap jenis metode sentrifugasi.

Referensi:

1. “Pemisahan Sentrifugasi.” Sigma-Aldrich, Tersedia di sini.

Gambar Courtesy:

1. “Differentielle zentrifugation” Oleh Thomasione – Karya sendiri (Teks asli: selbst erstellt) (Domain Publik) melalui Commons Wikimedia 2. “Gradien kepadatan” Oleh Pengunggah asli adalah Mlw3559 di Wikibooks Inggris – Ditransfer dari en.wikibooks ke Commons. (CC BY-SA 2.5) melalui Commons Wikimedia